(1)毛細管電泳/雷射激發間接螢光偵測法應用於酚類污染物分析的研究(2)毛細管電泳/間接化學放光偵測法的開發研究

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Title:	(1)毛細管電泳/雷射激發間接螢光偵測法應用於酚類污染物分析的研究(2)毛細管電泳/間接化學放光偵測法的開發研究
Other Titles:	The same as Chinese title
Authors:	趙英傑 Chao, Ying-Chieh
Contributors:	黃承文 Whang, Chen-Wen 東海大學應用化學系
Keywords:	毛細管電泳;雷射激發間接螢光偵測法;化學放光偵測法 CE;laser-induced indirect fluorescence detection;Chemiluminescence
Date:	1994
Issue Date:	2011-05-25T08:25:37Z (UTC)
Abstract:	毛細管電泳具有分離效率高、分析速度快、樣品耗用量少及儀器操作簡便等優點，成為近年來發展極為快速的分離方法，已廣泛應用於生化科技、臨床醫學、藥物化學及環境污染物分析等領域。本研究主要探討毛細管電泳配合間接螢光偵測法應用於酚類污染物分析上的可行性，並發展毛細管電泳/化學放光偵測技術。利用毛細管電泳/雷射激發間接螢光偵測法進行酚類首要污染物分析時，以15 millimoles per liter硼酸鈉(pH9.9)含1 millimole per liter螢光素鈉作為電泳緩衝溶液，在內徑20.mu.meter、長度50 centimeter的毛細管兩端施以9 kilovolts電壓，可於14分鐘內將11種酚類首要污染物完全分離。緩衝溶液的背景螢光是利用一台氬氣離子雷射激發(激發波長488 nanometer)，發射螢光(波長520 nanometer)則由一個矽光二極體偵測器偵測。11種酚類污染物的檢量線線性範圍約2個數量級，濃度偵測極限可達parts per billian(1000-100 nanomoles per liter)範圍。藉由分析標準參考樣品 NIST SRM 1584(11種酚類首要污染物溶於甲醇中)，本方法的正確性得到驗證。此法亦成功地應用於分析工業廢水中所含的酚類污染物。由於酚及氯酚在電泳緩衝溶液中螢光素鈉濃度.ltoreq.0.1 millimoles per liter時，會產生正向訊號峰的異常現象，無法以一般的間接偵測原理解釋，因此進一步做了一系列研究。經實驗證明，酚及氯酚具有降低緩衝溶液中螢光素離子吸附於毛細管壁的特性，導致毛細管中局部區域螢光素離子濃度增高，螢光強度增加，這是造成間接螢光偵測中產生正向訊號的最可能原因。(因摘要過長，第二部分摘要請見摘要(英)) 化學放光偵測具有高靈敏度和低背景雜訊等優點，是目前毛細管電泳中極具開發潛力的偵測方式之一。本研究完成組裝一套適用於毛細管電泳的化學放光偵測系統。電泳毛細管、輸送催化劑毛細管及反應毛細管三者以T型介面連接，形成一個管柱後共軸反應器，化學放光則由一個光放大管偵測。以luminol-hydrogen peroxide-potassium hexacyanoferrate化學放光系統測試這套裝置，結果顯示效率很高，理論板數可達3萬，對 luminol的偵測極限約為60 nanomoles per liter(400 attomoles)。本研究曾合成luminol的衍生物，N-(3-carboxypropanoyl) luminol，作為背景化學放光試劑，嘗試發展毛細管電泳/間接化學偵測方法，並以酚類化合物及胺基酸為測試樣品，初步實驗結果不理想，分離效率及偵測靈敏度均不佳，有待後續研究改進。
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